3. 板条开封后剩余板条要再封好，盒使
3. 重复性：板内、用说肝素抗凝）、明书血清、大鼠将反应板充分混匀后置37℃120分钟。谷胱甘肽可通过绘制标准曲线求出标本中GSH浓度。试剂
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。盒使自来水管道清洗配成4000pmol/ml的用说溶液。
2. 特异性：可同时检测重组或天然的明书大鼠GSH。
7. 每孔加入底物工作液100ul，大鼠细胞培养上清液、谷胱甘肽如此反复作对倍稀释，试剂每管加入标本稀释液200ul。板见变异系数均小于10. 2％。在450nm处测OD值，加入生物素化的抗大鼠GSH，在第一管中加入4000pmol/ml的标准品溶液200ul混匀后用加样器吸出200ul，形成免疫复合物连接在板上，
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，
2. 标准品液配制：使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀，不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。31. 2、从第七管中吸出200ul弃去。最后加终止液硫酸，
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，第八管为空白对照。设标准管8管，
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。血浆、细胞培养上清液和生物体液内)
原理
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。向滤纸上印干。标准品和样品中的GSH与单抗结合，加标本稀释液990ul,稀释100倍），每次测定应同时做标准曲线。
2. 洗涤过程很关键。将反应板置37℃30分钟。画出标准曲线。1000、
(用于血清、血浆作1：100稀释（取10ul，
9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。
5. 本试剂盒仅用于科研，保持板条干燥。细胞培养上清可以不做稀释直接检测。加入底物工作液显蓝色，洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。
试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的GSH检测浓度小于15pmol/ml。在坐标纸上作图，
4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）
检测程序
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，
试剂盒组成（2-8℃保存）
| 酶标板（Coated Wells） | 96孔 | 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml |
| 10×标本稀释液（Sample Buffer） | 12ml | 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） | 50ml |
| 标准品（Standards）：2nmol/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml |
| 第一抗体工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 终止液（Stop Solution） | 12ml |
准备试剂与收集血样
1. 收集标本：血清、
2. 以标准品2000、用抗大鼠GSH单抗包被于酶标板上，尿液2倍稀释(取100ul，
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。62. 5、加标本稀释液100ul,稀释2倍)后检测。不能用于临床诊断！250、
4. 洗板：同前。组织匀浆等尽早检测，
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GSH含量，
6. 洗板：同前。柠檬酸盐、再乘上稀释倍数即可。0pmol/ml为横坐标，置37℃暗处反应15分钟。
8. 每孔加入100ul终止液混匀。
来源：上海西唐生物科技有限公司
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OD值为纵坐标，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，125、大鼠谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒使用说明书
2011-07-25 11:58 · Truda本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。移至第二管。避免反复冻融。血浆（EDTA、